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男女呻吟久久免费视频 人表面活性蛋白D,人表面活性蛋白D酶联免疫的操作方法

2012年05月31日 10:07:49人气:433来源:上海沪宇实验室设备有限公司

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关 键 词 标准品,酶,活性蛋白
【资料简介】

试剂盒 应用双抗体夹心法测定标本中 人表面活性蛋白 D(SP-D) 水平。用纯化的 人表面活性蛋白 D(SP-D) 抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入 表面活性蛋白 D(SP-D) 再与 HRP 标记的 表面活性蛋白 D(SP-D) 抗体结合,形成抗体 - 抗原 - 酶标抗体复合物,经过*洗涤后加底物 TMB 显色。 TMB HRP 酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的 表面活性蛋白 D(SP-D) 呈正相关。用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度( OD 值),通过标准曲线计算样品中 人表面活性蛋白 D(SP-D) 浓度。

标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。

1. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、 待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样 50 μl 待测样品孔中先加样品稀释液 40 μ l ,然后再加待测样品 10 μ l (样品zui终稀释度为 5 倍)。 加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。

2. 温育:用封板膜封板后置 37 温育3 0 分钟。

3. 配液:将 30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30 倍稀释后备用

4. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置 30 秒后弃去,如此重复 5 次,拍干。

5. 加酶:每孔加入酶标试剂 50μl ,空白孔除外。

6. 温育:操作同 3

7. 洗涤:操作同 5

8. 显色:每孔先加入显色剂 A50μl ,再加入显色剂 B50μl ,轻轻震荡混匀, 37 避光显色15分钟.

9. 终止:每孔加终止液 50μl ,终止反应(此时蓝色立转黄色)。

10. 测定:以空白空调零, 450nm 波长依序测量各孔的吸光度( OD 值)。 测定应在加终止液后 15 分钟以内进行。

上海沪宇实验室设备有限公司作者

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