技术中心

牛牛天天人人综合影院 牛伪狂犬病毒(PRV)定性检测试剂盒(ELISA)

2012年06月07日 11:04:19人气:501来源:上海卡努生物科技有限公司

资料类型 jpg文件 资料大小 4543
下载次数 53 资料图片 【点击查看】
上 传 人 上海卡努生物科技有限公司 需要积分 0
关 键 词 牛牛天天人人综合影院 牛伪狂犬病毒(PRV)定性检测试剂盒(ELISA),上海卡努生物,elisa
【资料简介】

本试剂盒只能用于科学研究,不得用于医学诊断。

牛伪狂犬病毒( PRV )定性检测试剂盒( ELISA

使用说明书

【试剂盒名称】

牛伪狂犬病毒( PRV )定性检测试剂盒( ELISA

【试剂盒用途】

定性检测牛血清、血浆及相关液体样本中伪狂犬病毒( PRV )。

【检测原理】

本试剂盒采用双抗体一步夹心酶联免疫吸附法( ELISA )。将阴性对照、阳性对照、待测样本和酶标工作液加入到预先包被牛伪狂犬病毒( PRV )抗体的透明酶标包被板中,温育足够时间后,洗涤除去未结合的成分。依次加入显色剂 A B 液,显色剂( TMB )在辣根过氧化物酶( HRP )催化下转化为蓝色产物,在酸的作用下变成黄色,颜色的深浅与样品中牛伪狂犬病毒( PRV )浓度呈正相关, 450nm 波长下测定 OD 值,根据阴性对照、阳性对照和样品的 OD 值,判断样本中是否含有牛伪狂犬病毒( PRV )。

【试剂盒组成】

1

酶标包被板

12 ×8

7

显色剂 A

6mL

2

阴性对照

0.6mL

8

显色剂 B

6mL

3

阳性对照

0.6mL

9

终止液

6mL

4

20 倍浓缩洗涤液

25mL

10

说明书

1

5

样本 稀释液

6mL

11

封板膜

2

6

酶标试剂

10mL

12

密封袋

1

【需要而未提供的试剂和器材】

1 37 恒温箱

2、 标准规格酶标仪

3、 精密移液器及一次性吸头

4、 蒸馏水

5、 一次性试管

6、 吸水纸

【操作步骤】

1 、准备:从冰箱取出试剂盒,室温复温平衡 30 分钟。

2 、配液:用蒸馏水将 20 倍浓缩洗涤液稀释成原倍的洗涤液。

3 、加对照品和待测样本:取足够数量的 酶标包被板,固定于框架上, 分别设置阳性对照孔、阴性对照孔、待测样本孔和空白对照孔,记录各孔位置,在对照品孔中加入阳性对照品和阴性对照品各 50μL ;待测样本孔中先加入待测样本 10μL ,再加* 40μL (即样本稀释 5 倍);每孔再加入酶标工作液 100μL ;空白对照孔不加。

4 、温育: 37 水浴锅或恒温箱温育6 0min

5 、洗板:弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置 1min ,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板 5 次(也可用洗板机按说明书操作洗板)。

6 、显色:每孔先加入显色剂 A 50μL ,再加入显色剂 B 50μL 37 避光显色15min

7 、终止: 取出酶标板,每孔加终止液 50μL ,终止反应(颜色由蓝色立转黄色)。

8 、测定: 以空白孔调零,在终止后 15 分钟内,用 450nm 波长测量各孔的吸光值( OD 值)。

【样本要求】

1 、样本 不能含叠氮钠(NaN3 ,因为 叠氮钠(NaN3)是 辣根过氧化物酶(HRP)的抑制剂。

2、 标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能立即试验,可 将标本放于 -20 保存,但应避免反复冻融。

3 、样本应充分离心,不得有溶血及颗粒。

【注意事项】

1 、实验严格按照说明书的操作进行,实验结果判定必须以酶标仪读数为准。

2 酶标包被板开封后如未用完,应立即装入密封袋中加干燥剂保存。

3 、建议所有的标准品、样本和空白对照都做双份检测,取平均值,以减小实验误差。

4 、若显色过浅,可适当延长底物温育时间。

5 、为避免交叉污染,标准品、样本和空白对照每加一个就要更换一次吸头; 酶标 工作液、*和底物等公共组分,要悬臂加样,不得碰到微孔 ;不得重复使用 封板膜

6 、试剂盒保质期内使用,不同批号的试剂不得混用。

7 、底物 B 对光敏感,避免长时间暴露于光下。

【结果判断】

1 试验有效性:阳性对照孔OD值平均值≥1.00

阴性对照孔OD值平均值≤0.15

2 临界值(Cut off)计算:临界值=阴性对照孔平均值+0.15

3 阴性判断:样品OD值<临界值(Cut off),样品为阴性

4 阳性判断:样品OD值>临界值(Cut off),样品为阳性

【操作程序总结】

准备试剂,样品和对照品


加入准备好的样品、对照品品和酶标工作液, 37反应60分钟

洗板5次,加入显色液AB 37显色15分钟

加入终止液

15 分钟之内读OD

计算

【规格】

96 人份/

【贮藏】

2-8 ,避光防潮保存。

【有效期】

6 个月

上海卡努生物科技有限公司作者

上一篇:绿色水处理药剂聚丙烯酰胺PAM絮凝剂的好处有哪些?

下一篇:聚丙烯酰胺生产厂家为客户讲解PAM的聚合技术


我要投稿
  • 投稿请发送邮件至:(邮件标题请备注“投稿”)[email protected]
  • 联系电话0571-87759680
环保行业“互联网+”服务平台
环保在线APP

功能丰富 实时交流

环保在线小程序

订阅获取更多服务

微信公众号

关注我们

抖音

环保在线网

抖音号:hbzhan

打开抖音 搜索页扫一扫

视频号

环保在线

公众号:环保在线

打开微信扫码关注视频号

快手

环保在线

快手ID:2537047074

打开快手 扫一扫关注
意见反馈