牛牛天天人人综合影院 猪乙型脑炎ELISA诊断试剂盒使用说明书

【资料简介】

猪乙型脑炎 ELISA 诊断试剂盒使用说明书

【用途】

猪乙型脑炎 ELISA 诊断试剂盒用于检测猪血清中乙型脑炎病毒抗体。评估猪场乙型脑炎疫苗免疫状况。猪乙型脑炎的流行病学调查。

【简介】

试剂盒由抗原包被的微孔板，酶标羊抗猪 IgG 及其它试剂制成，应用间接 ELISA 原理检测猪血清中抗乙型脑炎病毒的抗体。

【原理】

本试剂盒是采用乙脑病毒（ JEV ）弱毒疫苗毒株经纯化、浓缩制成的抗原包被微孔板，在试验中，加入稀释的对照血清和待检血清，经温育后，若样品中含有乙型脑炎病毒特异性抗体，则将与微孔板上抗原结合，经洗涤除去未结合的抗体和其他成分后；再加入酶标二抗，与微孔板上抗原抗体复合物发生特异性结合；再经洗涤除去未结合的酶结合物，在孔中加 TMB 底物液，与酶反应形成蓝色产物，加入 HF 溶液中止反应后，用酶标仪 630nm 波长测定各反应孔中的 OD 值。

【试剂盒主要成分】

1． 包被抗原的微孔板 2 块 （ 96 孔）

2． 阴（绿盖）、阳（红盖）性对照血清 各 1 管 （ 1ml/ 管）

3． 抗猪 IgG-HRP 结合物（黄盖） 1 瓶 （ 22ml/ 瓶）

4． 20 倍浓缩洗涤液 （白盖） 1 瓶 （ 30ml/ 瓶）

5． 底物 A （紫盖）液、 B （黄盖）液 各 1 瓶 （ 12ml/ 瓶）

6． 终止液（蓝盖） 1 瓶 （ 12ml/ 瓶）

7． 样品稀释液 （透明盖） 1 瓶 （ 50ml/ 瓶）

【 用前准备 】

仔细阅读说明书，所有试剂在 4℃条件下保存，禁止结冰，如果干燥袋发红不能使用，不用的孔必须用封口膜封住以防潮湿对平板有害，不要使平板接触强光和氧化物。不要使用过期的成分和混合使用成分。注意加样和冲洗，以确保试验的度和准确度。操作过程中注意安全，要使用手套，终止液含有氢氟酸使用要小心。所有的废液要经过处理和净化。

本品为兽用产品。

【未提供的需用材料】

微量加样器、加液槽、蒸馏水、恒温箱、酶标仪、吸水纸

【注意事项】

1、 试剂盒使用前各试剂应平衡至室温。

2、 不同批号试剂盒的试剂组分不得混用。

3、 注意防止试剂盒各组分受污染。

4、 微孔板拆封后避免受潮或沾水 （ 每次将剩余的微孔板用封口袋扎紧后尽快置于 4 ℃ ） 。

【试剂配制】

洗涤液：用蒸馏水稀释 20 倍 浓缩洗涤液，混匀。

【操作步骤】

1、 取预包被的微孔板（根据样品多少，可拆开分次使用）。用样品稀释液将待检样品 40 倍 稀释后加入板孔中，每孔加 100μl 。阴、阳性对照各设 2 孔，每孔 100μl 。另设一空白对照孔，空白对照孔加 100μl 稀释液。轻轻振匀孔中样品（勿溢出），置 37 ℃ 温育 30min 。

2、 甩掉板孔中的溶液，用洗涤液洗板 3 次， 300μl/ 孔，每次静置 3 分钟倒掉，zui后一次在不掉屑干净吸水纸上拍干。

3、 每孔加酶标二抗（抗猪 IgG-HRP 结合物） 100μl ，置 37 ℃ 温育 30min 。

4、 洗涤 3 次 , 方法同 2 。

5、 每孔加底物 A 液、 B 液各 1 滴 （50μl） ，混匀，室温（ 20-25 ℃）避光显色 10min 。

6、 每孔加终止液 1 滴 （50μl） ， 10 分钟内测定结果。

【结果判定】

以空白孔调零，在酶标仪上测各孔 OD630 值。试验成立的条件是阳性对照孔平均 OD630 值大于或等于 0.4 ，阴性对照孔平均 OD630 值必须小于 0.2 。

样品 OD630 值大于 0. 4 ，判为阳性；样品 OD630 值在 0. 2 到 0.4 之间，判为可疑；样品 OD630 值小于 0. 2 ，判为阴性。

【规格】 96 孔 ×2块

【有效期】 6 个月

【贮存】 2-8 ℃避光保存

【生产日期】 见试剂盒外包装

提示：酶标板真空包装袋若有漏气，酶标板仍然正常有效，不影响实验结果，请放心使用