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男女呻吟久久免费视频 猪髓磷脂碱性蛋白(MBP)ELISA试剂盒,操作步骤

2012年09月28日 09:50:02人气:340来源:江莱生物-中国老牌试剂供应商

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关 键 词 操作步骤,Elisa试剂盒,江莱生物,猪髓磷脂碱性蛋白(MBP)
【资料简介】

操作步骤

1. 标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔 10 孔,在*、第二孔中分别加标准品 100μl ,然后在*、第二孔中加标准品稀释液 50μl ,混匀;然后从*孔、第二孔中各取 100μl 分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液 50μl ,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取 50μl 弃掉,再各取 50μl 分别加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液 50ul ,混匀;混匀后从第五、第六孔中各取 50μl 分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液 50μl ,混匀后从第七、第八孔中分别取 50μl 加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液 50μl ,混匀后从第九第十孔中各取 50μl 弃掉。(稀释后各孔加样量都为 50μl ,浓度分别为 1800ng/L 1200ng/L 600ng/L 300ng/L 150ng/L )。

2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液 40μl ,然后再加待测样品 10μl (样品zui终稀释度为 5 倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。

3. 温育:用封板膜封板后置 37 温育3 0 分钟。

4. 配液:将 30 48T 20 倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30 48T 20 倍)倍稀释后备用。

5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置 30 秒后弃去,如此重复 5 次,拍干。

6. 加酶:每孔加入酶标试剂 50μl ,空白孔除外。

7. 温育:操作同 3

8. 洗涤:操作同 5

9. 显色:每孔先加入显色剂 A50μl ,再加入显色剂 B50μl ,轻轻震荡混匀, 37 避光显色15分钟.

10. 终止:每孔加终止液 50μl ,终止反应(此时蓝色立转黄色)。

11. 测定:以空白空调零, 450nm 波长依序测量各孔的吸光度( OD 值)。 测定应在加终止液后 15 分钟以内进行。

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