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荧光素标记甲状腺核转录因子-1/甲状腺特异增强子结合蛋白抗体IgG
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关 键 词 | 荧光素标记甲状腺核转录因子-1/甲状腺特异增强子结合蛋白抗体IgG,Anti-TTF-1/FITC, |
- 【资料简介】
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荧光素标记甲状腺核转录因子-1/甲状腺特异增强子结合蛋白抗体IgG
Anti-TTF-1/FITC 荧光素标记甲状腺核转录因子-1/甲状腺特异增强子结合蛋白抗体IgG Anti-TTF-2/FITC 荧光素标记甲状腺转录因子-2抗体IgG Anti-Tubb3/FITC 荧光素标记β微管蛋白-Ⅲ抗体IgG Anti-Tubulin-α/FITC 荧光素标记微管蛋白α抗体IgG Anti-Tubulin-β/FITC 荧光素标记微管蛋白抗体IgG Anti-Tubulin-β/FITC 荧光素标记微管蛋白抗体IgG Anti-β-Actin/HRP 辣根过氧化物酶标记β-肌动蛋白(抗体) Anti-Tubulin-γ/FITC 荧光素标记微管蛋白-γ抗体IgG Anti-VTG/HRP 辣根过氧化物酶标记兔抗鱼、青鳉鱼卵黄蛋白原抗体IgG Anti-Tumstatin/Col4a3/FITC 荧光素标记肿瘤抑素抗体IgG Anti-TWIST protein/FITC 荧光素标记TWIST转录因子蛋白抗体IgG Rabbit Anti-human Fibrinogen/HRP 辣根过氧化物酶标记兔抗人可溶性纤维蛋白原抗体IgG Anti-TY3H/FITC (Tyrosine Hydroxylase ) 荧光素标记*羟化酶抗体IgG Anti-Tyrosinase/FITC 荧光素标记*酶抗体IgG Anti-Tβ10/FITC 荧光素标记*β10抗体IgG Anti-UAT/FITC 荧光素标记尿酸盐转运子抗体IgG Anti-Ubiquitin/FITC 荧光素标记泛素蛋白抗体IgG 1 .动物的选择 纯种 BALB/C 小鼠,较温顺,离窝的活动范围小,体弱,食量及排污较小,一般环境洁净的实验室均能饲养成活。目前开展杂交瘤技术的实验室多选用纯种 BALA/C 小鼠。
2 .免疫方案 选择合适的免疫方案对于细胞融合杂交的成功,获得高质量的 McAb 至关重要。一般在融合前两个月左右根据确立免疫方案开始初次免疫,免疫方案应根据抗原的特性不同而定。
( 1 )可溶性抗原免疫原性较弱,一般要加佐剂,半抗原应先制备免疫原,再加佐剂。常用佐剂:福氏*佐剂、福氏不*佐剂。
初次免疫 抗原 1 ~ 50μg 加福氏*佐剂皮下多点注射或脾内注射(一般 0.8 ~ 1ml,0.2ml/ 点)
↓3 周后
第二次免疫 剂量同上,加福氏不*佐剂皮下或 ip (腹腔内注射)( ip 剂量不宜超过 0.5ml )
↓3 周后
第三次免疫 剂量同一,不加佐剂, ip ( 5 ~ 7 天后采血测其效价)
↓2 ~ 3 周
加强免疫,剂量 50 ~ 500μg 为宜, ip 或 iv (静脉内注射)
↓3 天后
取脾融合
目前,用于可溶性抗原(特别是一些弱抗原)的免疫方案也不断有所更新,如: ① 将可溶性抗原颗粒化或固相化,一方面增强了抗原的免疫原性,另一方面可降低抗原的使用量。 ② 改变抗原注入的途径,基础免疫可直接采用脾内注射。 ③ 使用细胞因子作为佐剂,提高机体的免疫应答水平,增强免疫细胞对抗原的反应性。
( 2 )颗粒抗原免疫性强,不加佐剂就可获得很好的免疫效果。以细胞性抗原为例,免疫时要求抗原量为 1 ~ 2×107 个细胞。
初次免疫 1×107/0.5ml ip
↓2 ~ 3 周后
第二次免疫 1×107/0.5ml ip
↓3 周后
加强免疫(融合前三天) 1×107/0.5ml ip 或 iv
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