女人天天干夜夜爽视频 牛弹性蛋白酶 （Elastase）说明书间接法

【资料简介】

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牛弹性蛋白酶（Elastase）酶联免疫分析（ ELISA ）

试剂盒使用说明书

本试剂盒仅供研究使用。

使用目的：

本试剂盒用于测定牛血清、血浆及相关液体样本中弹性蛋白酶（ Elastase ）的含量。

实验原理

本试剂盒应用间接法测定标本中牛弹性蛋白酶（ Elastase ）水平。用纯化的牛弹性蛋白酶（ Elastase ）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入已知浓度的 弹性蛋白酶（ Elastase ） 标准品和未知浓度的 弹性蛋白酶（ Elastase ） 待检样品， 温育后，加入*标记的抗 IgG 抗体， 再与链霉亲和素 -HRP 结合，形成免疫复合物，经过*洗涤后加底物 TMB 显色。 TMB 在 HRP 酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的 弹性蛋白酶（ Elastase ） 呈正相关。用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度（ OD 值），通过标准曲线计算样品中牛弹性蛋白酶（ Elastase ）浓度。

试剂盒组成

1	20 倍浓缩洗涤液	20ml × 1 瓶	8	标准品 S1 （ 36 U/L ）	0.5ml × 1 瓶
2	链霉亲和素 -HRP	6ml × 1 瓶		标准品 S2 （ 24U/L ）	0.5ml × 1 瓶
3	酶标包被板	12 孔× 8 条		标准品 S3 （ 12U/L ）	0.5ml × 1 瓶
4	*标记的抗 -IgG 抗体	6ml × 1 瓶		标准品 S4 （ 6U/L ）	0.5ml × 1 瓶
5	显色剂 A 液	6ml × 1 瓶		标准品 S5 （ 3U/L ）	0.5ml × 1 瓶
6	显色剂 B 液	6ml × 1/ 瓶	9	说明书	1 份
7	终止液	6ml × 1 瓶	10	封板膜	2 张

标本要求

1． 不能检测含NaN3的样品 ，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

2． 标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可 将标本放于-20℃ 保存，但 应避免反复冻融

操作步骤

1. 根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定，能使用复孔的尽量做复孔。
2. 加样： 分别设空白孔（空白对照孔不加样品，其余各步操作相同）、标准品孔、 待测样品孔。然后在标准品孔中加入标准品50μl，在样本反应孔中加入 50 微升样本，盖上封板膜，轻轻振荡混匀， 37 ℃ 温育 45 分钟。
3. 配液：将 30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30 倍稀释后备用
4. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置 30 秒后弃去，如此重复 4 次，拍干。
5. 加*标记的抗-IgG抗体：每孔加入*标记的抗-IgG抗体50μl。37℃ 温育30分钟
6. 洗涤：操作同4。
7. 加链霉亲和素-HRP：每孔加入50μl 的链酶亲和素-HRP，轻轻振荡混匀，37℃ 温育30分钟。
8. 洗涤：操作同4。
9. 显色：每孔先加入显色剂A 50μl，再加入显色剂B 50μl，轻轻震荡混匀，37℃ 避光显色15分钟.
10. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
11. 测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。

计算

以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值待入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。

注意事项

1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。

2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。

3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间控制在5分钟内，如标本数量多，*使用排枪加样。

1. 如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔*孔的OD值），请先将样本稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请zui后乘以稀释倍数（ ×5×n ）。
2. 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

6．本试剂不同批号组分不得混用。显色剂B请避光保存。

7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.

8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。

9. 如与英文说明书有异，以英文说明书为准。

线形范围：

1 U/L -45 U/L

规格：

96人份/盒

保存条件及有效期

1．试剂盒保存： ；2-8℃ 。

2．有效期：6个月