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牛牛天天人人综合影院 人抗Q热抗体(anti-Q-Ab)elisa试剂盒使用说明书

2014年07月14日 13:13:40人气:376来源:环球试剂网

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【资料简介】

人抗Q热抗体(anti-Q-Ab) elisa试剂盒 使用说明书

实验原理

本试剂盒应用双抗体夹心法测定 标本 人抗Q热抗体(anti-Q-Ab) 水平。用纯化的 人抗Q热抗体(anti-Q-Ab) 抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入 抗Q热抗体(anti-Q-Ab) ,再与HRP标记的 抗Q热抗体(anti-Q-Ab)  抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物 ,经过*洗涤后 底物TMB显色。TMB在 HRP 酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的 抗Q热抗体(anti-Q-Ab) 呈正相关。用酶标仪在 450 nm波长下测定吸光度(OD值), 通过标准曲线 计算样品 人抗Q热抗体(anti-Q-Ab) 浓度。

目的: 本试剂盒用于测定 血清,血浆及相关液体样本中 抗Q热抗体(anti-Q-Ab) 含量。

服务承诺:

供货期:款到发货。
工作时间内免费的技术咨询和指导 。
为客户提供来样检测服务,zui大限度实验结果的有效性(免费代测)。

保存条件及有效期:

试剂盒保存: 2-8 | 有效期:6个月

人抗Q热抗体(anti-Q-Ab)  elisa试剂盒】 样本处理及要求

1. 血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。

2. 血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。

3. 尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。

4. 细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。

5. 组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。

6. 标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可 将标本放于 -20 ℃保存,但 避免反复冻融 .

7. 不能检测含NaN3的样品 ,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。

操作步骤

  • 标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在*、第二孔中分别加标准品100 μ l,然后在*、第二孔中加标准品稀释液50 μ l,混匀;然后从*孔、第二孔中各取100 μ l分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50 μ l,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50 μ l弃掉,再各取50 μ l分别加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各取50 μ l分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50 μ l,混匀后从第七、第八孔中分别取50 μ l加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50 μ l,混匀后从第九第十孔中各取50 μ l弃掉。(稀释后各孔加样量都为50 μ l,浓度分别为1800ng/L,1200ng/L ,600ng/L,300ng/L, 150ng/L )。
  • 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、 待测样品孔 。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40 μ l,然后再加待测样品10 μ l(样品zui终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁, 轻轻 晃动 混匀
  • 温育:用封板膜封板后置37 ℃温育3 0 分钟
  • 配液:将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48T的20倍)倍稀释后备用。
  • 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体, 甩干 ,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
  • 加酶:每孔加入酶标试剂50 μ l,空白孔除外
  • 温育:操作同3。
  • 洗涤:操作同5。
  • 显色:每孔先加入显色剂A50 μ l,再加入显色剂B50 μ l,轻轻震荡混匀,37 ℃避光显色15分钟.
  • 终止:每孔加终止 液50μl,终止反应 (此时蓝色立转黄色)
  • 测定:以空白空调零, 4 50 nm波长依序测量各孔的 吸光 度(OD值) 测定应在加终止液后15分钟以内进行。

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