女人天天干夜夜爽视频 大鼠血管内皮生长因子（VEGF）试剂盒使用说明书

【资料简介】

大鼠 血管内皮生长因子 （VEGF） 试剂盒使用说明书

本 试剂盒 仅供研究使用。

检测范围： 96T

5pg/ml-60pg/ml

使用目的：

本 试剂盒 用于测定大鼠血清、血浆及相关液体样本中 血管内皮生长因子  （VEGF） 含量。

实验原理

本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠 血管内皮生长因子  （VEGF）水平。用纯化的大鼠 血管内皮生长因子  （VEGF）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入血管内皮生长因子 （VEGF） ，再与HRP标记的血管内皮生长因子  （VEGF）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过*洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的血管内皮生长因子  （VEGF）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中大鼠 血管内皮生长因子  （VEGF）浓度。

试剂盒 组成

	30倍浓缩洗涤液	20ml×瓶	7	终止液	6ml×瓶
2	酶标试剂	6ml×瓶	8	标准品（320pg/ml）	0.5ml×瓶
3	酶标包被板	2孔×8条	9	标准品稀释液	.5ml×瓶
4	样品稀释液	6ml×瓶	0	说明书	份
5	显色剂A液	6ml×瓶		封板膜	2张
6	显色剂B液	6ml×/瓶	2	密封袋	个

操作步骤

.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。

60pg/ml	5号标准品	50μl的原倍标准品加入50μl标准品稀释液
80pg/ml	4号标准品	50μl的5号标准品加入50μl标准品稀释液
40pg/ml	3号标准品	50μl的4号标准品加入50μl标准品稀释液
20pg/ml	2号标准品	50μl的3号标准品加入50μl标准品稀释液
0pg/ml	号标准品	50μl的2号标准品加入50μl标准品稀释液

2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品0μl（样品zui终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。

3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

4.配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用

5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。

6.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。

7.温育：操作同3。

8.洗涤：操作同5。

9.显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色5分钟.

0.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。

.测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后5分钟以内进行。

计算

  以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。

试剂盒 注意事项

．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡5-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。

2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。

3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间控制在5分钟内，如标本数量多，使用排枪加样。

4． 请每次测定的同时做标准曲线，做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔*孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请zui后乘以总稀释倍数（×n×5）。

5． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

6．底物请避光保存。

7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.

8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。

9．本试剂不同批号组分不得混用。

0. 如与英文说明书有异，以英文说明书为准。