女人天天干夜夜爽视频 Na~+-K~+-ATP酶活性比色法定量检测试剂盒说明书

【资料简介】

Na~+-K~+-ATP 酶活性比色法定量检测试剂盒说明书

主要用途

ATP 酶存在于组织细胞及细胞器的膜上，是生物膜上的一种蛋白酶，机体在缺氧及等状态下， ATP 酶受到损伤，活力下降。 ATP 酶活力的大小是各种细胞能量代谢及功能有无损伤的重要指标。本测试盒可测钠钾 —ATP 酶、钙镁 —ATP 酶的活性。样品为各种组织及红细胞等，本法的zui大特点是样品前处理不需要高速离心机，方法简便、快速。

产品内容

缓冲液（ Reagent A ）                       6 毫升

反应液（ Reagent B ）                       6 毫升

底物液（ Reagent C ）                       6 毫升

阴性液（ Reagent D ）                       6 毫升

标准品（ reagent E ）                        6 微升

产品说明书                                 1 份

保存方式

保存反应液（ Reagent B ）和底物液（ Reagent C ）在－ 20 ℃冰箱里，其余的保存在  4 ℃冰箱里；底物液（ Reagent C ）避免光照，有效保证  6 月

用户自备

1.5 毫升离心管：用于反应液配制的容器

微型台式离心机：用于样品制备

比色皿或酶标板：用于比色的容器

分光光度仪：用于比色分析

酶标仪：用于微量样品比色分析

实验步骤

实验开始前，将－ 20 ℃冰箱里的试剂盒中的反应液（ Reagent B ）和底物液（ Reagent C ）置入冰槽里融化。底物液（ Reagent C ）避免光照。然后进行下列操作。

• 样品准备

选择一：血浆样品

1 ．准备好  ACD 抗凝管（注意：避免使用肝素或  EDTA 抗凝管）

2 ．抽取  2 毫升血液，置于抗凝管里

3 ．放进  4 ℃微型台式离心机离心  10 分钟，速度为  5000 g

4 ．小心移取上层黄色液体到新的  1.5 毫升离心管――此为血浆成分（注意：避免触碰白色液体层）

5 ．即刻置于冰槽里备用或放进－ 70 ℃冰箱里保存

6 ．（选择步骤）移取 50 微升进行蛋白定量测定

选择二：血清样品

1 ．准备好不含抗凝剂的储存管

2 ．抽取  2 毫升血液，置于储存管里

3 ．室温下，静置  30 分钟，直至血液凝结

4 ．放进  4 ℃微型台式离心机离心  15 分钟，速度为  5000 g

5 ．小心移取上层黄色液体到新的  1.5 毫升离心管――此为血清成分（注意：避免触碰白色液体层）

6 ．即刻置于冰槽里备用或放进－ 70 ℃冰箱里保存

7 ．（选择步骤）移取  50 微升进行蛋白定量测定

选择三：组织样本

准确称取组织重量，按照重量（ g ）：体积（ ml ） =1:9 的比例，加入 9 倍的是 PBS 或者生理盐水，冰水浴条件下机械匀浆， 2500 转 / 分，离心 10 分钟，去上清液待测。

二、测定准备

1. 准备好上述待测样品，置于冰槽里

2. 设定好分光光度仪（温度为  37 ℃）：波长  440nm

三、样本测定

1 ．在  96 孔酶标板上做好相应标记：背景对照，标准品孔和样品孔

2 ．分别移取  50 微升缓冲液（ Reagent A ）到相应孔中

3 ．设定标准品孔 ( 加入 50 微升标准品），样本孔 ( 加入 50 微升样本 ) 阴性液孔 ( 加入  50 微升阴性液（ Reagent D ）

4 ．分别加入 50 微升反应液（ Reagent B ）

5 ．轻轻摇动  96 孔酶标板

6 ．在  37 ℃温度下孵育  2 分钟

7 ．放进酶标仪，置零

8 ．取出酶标板，分别加入  50 微升底物液（ Reagent C ）

9 ．轻轻摇动酶标板

10 ．即刻放进酶标仪检测，包括（ 0 分钟初始读数和  5 分钟读数）

四，样本计算

样本活性 = 样本 OD 值 / 标准 OD 值 * 标品浓度