女人天天干夜夜爽视频 根据ELISA基本原理探讨其四大种类

【资料简介】

直接ELISA是所有ELISA中步骤zui简单的一种，其方法是将抗原按一定的比例用包被缓冲液稀释好包被到固相载体上，包被完成后简单洗涤，再加入封闭液，封闭结束后再次洗涤除去多余封闭液，加入稀释好的特异性的酶标抗体，37℃温育一小时或4℃温育过夜后，洗涤除去多余的抗体，加入底物显色并判读结果。zui后显色的深浅与加入的酶标抗体量成正比。对于双抗夹心ELISA，待检对象必须包括两个或者两个以上的表位，否则检测抗体无法与待检抗原结合，例如半抗原和小分子抗原都是不能用双抗夹心ELISA检测的。对于双抗原夹心ELISA，其操作与间接ELISA基本相同，但利用特异性的抗原代替酶标二抗，所以特异性比间接法更好。另外，由于间接ELISA中使用的二抗一般只能识别IgG，而双抗原夹心ELISA中任何类似的免疫球蛋白都可以被检测出，因此双抗原夹心ELISA比间接ELISA也更灵敏。
    下面我将结合一些试剂盒举例说明加拿大human interleukin-8(IL-8),这个指标试剂盒的用到的系统就是这种直接夹心ELISA,在此基础上发展了亲和素(avidin)*(biotin)系统(system)，以*标记的抗体（或抗原）代替原ELISA系统中的酶标抗体（抗原），加拿大 human interleukin-1β(IL-1β)，TNF-α，IL-6 均用到此体系。
竞争抑制ELISA又叫封闭ELISA，其主要原理是用待检抗原或抗体去干扰已经预先设计好的体系，zui终显色的结果与待检抗原或抗体的干扰程度成负相关。竞争抑制ELISA灵活性很强，可以在此基础上设计出更复杂的实验方案，从而派生出所谓的直接竞争抑制ELISA、间接竞争抑制ELISA、夹心竞争ELISA等特殊的ELISA方法。这里仅以直接竞争抑制ELISA和间接竞争抑制ELISA为例简单阐述原理。直接竞争抑制ELISA中，预先将抗原包被在固相载体上，并加入酶标的特异性抗体。实验时，加入待检抗原（或抗体），如果待检对象是抗原，则待检抗原就与预先包被在固相载体上的抗原竞争结构酶标抗体；如果待检测对象是抗体，则待检抗体就与系统中原有的酶标抗体竞争结合包被在固相载体上的抗原。洗涤过程就可以洗掉被竞争下的酶标抗体，zui后加底物显色。zui终显色的结果与待检原（或抗体）量成反比。直接竞争抑制ELISA的原理如图5。注意在直接竞争抑制ELISA中，同一预制备的体系既可以测定抗原，也可以测定抗体。