牛牛天天人人综合影院 植物赤霉素（GA）ELISA 检测试剂盒使用说明书

【资料简介】

植物赤霉素（GA）ELISA 检测试剂盒试验原理：

GA 试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验（ELISA）.已知GA 浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将GA 和标记的抗体同时温育。洗涤后，加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤，去除未结合的酶结合物，然后加入底物A、B，和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中GA 的浓度呈比例关系。

安全性

． 此试剂盒的人血制品中的HbsAg、和抗HIV为阴性，但没有实验室可*保证此血制品不会传染肝炎、AIDS或其它传染病，依据当地的安全条例处理本试剂盒里的成份及血清和血浆等样品。

2． 避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体，请尽快用水冲洗。

3． 实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。

4． 不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。

植物赤霉素（GA）ELISA 检测试剂盒操作注意事项

． 试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。

2． 实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。

3． 不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。

4． 使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。

5． 使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。

6． 洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。

7． 底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。

8． 加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。

9． 按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。

试剂的准备

． 标准品：标准品的系列稀释应在实验时准备，不能储存。稀释前将标准品振荡混匀。稀释比例按下表中进行：

40 nmol/L

（6号标准品）

原倍浓度不用稀释直接加入50ul。

20 nmol/L

（5号标准品）

00ul的原倍标准品加入00ul的标准品稀释液

0 nmol/L

（4号标准品）

00ul的5号标准品加入00ul的标准品稀释液

5.0 nmol/L

（3号标准品）

00ul的4号标准品加入00ul的标准品稀释液

2.5 nmol/L

（2号标准品）

00ul的3号标准品加入00ul的标准品稀释液

.25 nmol/L

（号标准品）

00ul的2号标准品加入00ul的标准品稀释液

0 nmol/L

（空白对照）

原始浓度不用稀释直接加入50ul。

2． 洗涤缓冲液（50×）的稀释：蒸馏水50倍稀释。

植物赤霉素（GA）ELISA 检测试剂盒操作步骤

． 使用前，将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫，以免加样时加入大量的气泡，产生加样上的误差。

2． 根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定，能使用复孔的尽量做复孔。

3． 加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的标记的抗体。盖上膜板，轻轻振荡混匀，37℃温育小时。

4． 甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作四次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。

5． 每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP，轻轻振荡混匀，37℃温育30分钟。

6． 甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作四次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。

7． 每孔加入底物A、B各50ul，轻轻振荡混匀，37℃温育5分钟。避免光照。

8． 取出酶标板，迅速加入50ul终止液，加入终止液后应立即测定结果。

9． 在450nm波长处测定各孔的OD值。