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动物细胞

时间:2016/4/6阅读:310
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 在合成培养基的发展过种有几点成功之处:可替代血清;针对不同类型的细胞制备zui适宜的培养基(例如:RPMI1640适合于类成淋巴细胞系);根据特殊的条件修正培养基(例如:Leibovitz L15不需要加入CO2和NaHCO3[Leibovitz,1963]).

   分离和繁殖某种特殊类型的细胞可能需要一种选择性的淋巴细胞培养基;而为了得到产物所进行的细胞培养(例如将细胞作为病毒繁殖的宿主,或将细胞用于非细胞特异性的分子生物学研究)则主要依赖于添加血清的Eagle’s MEM[Eagle1959]以及Dulbecco改良的DMEM[Dulbecco and Freerman,1959]或者是现在更多使用的RPMI1640[Moore et al.,1967].

然而许多工业化生产技术现在使用的是无血清培养基,这样做有利于产物的下游处理并可减少外来污染.在许多实验室还流行一种折中的方法:即将一种成分复杂的培养基(例如Ham’s F12[Ham,1965])与一种氨基酸和维生素含量较高的培养基(例如:DMEM)混合使用.

   这种培养基不利于纯化产物,人ELISA试剂盒纯度很高,对于原代培养以及细胞系的繁殖却可以产生多方面的促进作用.

   动物细胞体外大规模培养技术是在人工条件下,设定pH、温度、溶氧等,在细胞培养载体(容器)中高密度大量培养动物细胞用于生产生物制品的技术。常用的大规模培养的动物细胞有鸡胚成纤维细胞、原代地鼠肾细胞等多种元代细胞,及*、CHO细胞、Vero细胞等。这些细胞在疫苗生产、单抗制备、红细胞生成素等产品领域广泛应用。

   目前常用的细胞大规模培养方法有转瓶培养,细胞工厂培养,生物反应器培养等。转瓶技术为传统的贴壁细胞培养技术,细胞接种在旋转的圆筒形培养器-转瓶中,培养过程中转瓶不断旋转,使细胞交替接触培养液和空气。转瓶培养基具有结构简单,投资少,技术成熟,放大只需简单的增加转瓶数量等优点。但也有其缺点:劳动强度大,占地空间大,单位体积提供细胞生长的表面积小,细胞生长密度低,瓶间差异较难控制等,因而难以产业化或规模化生产。

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