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ELISA法测定单克隆抗体的效价的操作步骤2016/8/2
一、实验目的1、深入了解elisa法测定抗体效价的原理。2、掌握ELISA法测定单克隆抗体效价的方法。二、实验原理ELISA是以免疫学反应为基础，将抗原、抗体的特异性反应与酶对底物的催化作用相结合起来...
各种组织切片方法的操作步骤和应用范围2016/8/1
组织切片伴随着显微镜技术和免疫实验等的发展已经得到广泛的认同和应用。其中各种组织切片方法的操作步骤和应用范围各不相同，本文对其中的石蜡切片、苏木精染色、结缔组织染色等方法进行介绍。(一)常规石蜡切片的...
免疫共沉淀实验成功3大关键2016/8/1
一、总结的成败因素：1.有效裂解细胞。2.恰当选择处理样本的方式：超声或酶处理。3.选用适当适量抗体。4.恰当设置对照。5.不要过分交联DNA-蛋白质。6.交联所用的甲醛终浓度约为1%，交联时问需要预...
实验室常用6种耐热DNA聚合酶总结2016/7/29
耐热dna聚合酶多应用在PCR技术中。各种耐热DNA聚合酶均具有5'-3'聚合酶活性，但不一定具有3'-5'和5'-3'的外切酶活性。3'-5'外切酶活性可以消除错配，切平末端;5'-3'外切酶活性可...
限制性内切酶常见问题及注意事项2016/7/29
1)购买的限制性内切酶带有两种不同的酶切缓冲液，该用哪一种?每种限制性内切酶带有一管酶的zui适反应液(通常是一种4-CORE反应液)，可能还带有一只MULTI-CORE反应液。2)4-CORE酶切缓...
蛋白质的定量法与标准曲线的制备2016/7/28
A.Folin-phenol(lowrymethod)定量法此法以Biuret方法反应为基础发展而起，因此会严重干扰Biuret测定方法的因子都会影响此测定法的准确度。这些干扰因子包括：含-CS-NH...
细胞凋亡的几种检测方法2016/7/28
细胞凋亡的几种检测方法：一、形态学观察方法1、HE染色、光镜观察：凋亡细胞呈圆形，胞核深染，胞质浓缩，染色质成团块状，细胞表面有“出芽”现象。2、丫啶橙(AO)染色，荧光显微镜观察：活细胞核呈黄绿色荧...
质谱的试剂用品、实验操作、仪器和样品选择方法2016/7/27
质谱法在蛋白分析鉴定等实验中具有不可忽视的作用，本文对其中的样本制备试剂用品、实验操作、质谱仪的选择、样品的选择等方面进行详细的介绍。另外，这方面的FAQ、等信息可点击蓝色的字体查看。试剂耗材：Mil...
如何选择合适的蛋白含量测定方法2016/7/27
对许多实验来说，确定蛋白样品浓度是至关重要的。如果在2D电泳中，蛋白过多或过少，产生的后果都将是相当严重的。大多数蛋白样品可通过比色测定法定量。在典型的蛋白测定中，化学试剂加入到蛋白样品溶液里产生颜色...
Western Blot试剂的准备配方大全2016/7/26
WesternBlot试剂的准备配方大全:1.30%储备胶溶液：丙烯酰胺(Acr)29.0g亚甲双丙烯酰胺(Bis)1.0g混匀后ddH2O，37℃溶解，定容至100ml，棕色瓶存于室温。2.4×分离...
Western实验中内参基因的选择及使用方法2016/7/26
westernBlot实验常用于检测蛋白表达量、蛋白表达产物的正确性等。相对于其他检测蛋白的方法而言WesternBlot实验在蛋白的定性定量分析、与目的蛋白量的比较方面更简单一些。虽然，顺利的时候W...
冰冻切片的免疫组化染色操作步骤2016/7/25
冰冻切片的免疫组化染色操作步骤：1.新鲜组织立即在恒冷冰冻切片机内切片(也可-80℃保存)，厚度为5～6μm。2.载玻片可不打底，裱片后，立即用电吹风吹干。3.如不马上染色，可密封后-20℃保存。4....
胶体金标记实验的操作方法与步骤2016/7/25
胶体金标记实验的实验过程主要包含以下步骤：胶体金标记蛋白的制备及其与胶体金之间的用量比例的确定、胶体金和蛋白的结合、胶体金标记蛋白的纯化与质量检测等。1、蛋白质的处理：胶体金标记蛋白的制备胶体金对蛋白...
免疫荧光双标实验操作方法与注意事项2016/7/22
在同一组织细胞标本上需要同时检测两种抗原时，需进行双重荧光染色。双重免疫荧光标记法(doubleimmunofluorescencelabelingmethod)也分为直接法和间接法。(1)直接法双重...
免疫组化中可能遇到的问题解决2016/7/22
1、石蜡切片和冰冻切片的比较?(1)要求做冰冻切片的不一定能做石蜡切片，这是请教得出的结论。因为作石蜡切片时要高温烤片，可能会破坏组织的抗原性，如果组织的抗原性较稳定，则可作石蜡切片;但是要求做石蜡切...
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