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上海邦景实业有限公司
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ELISA捕获法测IgM抗体操作步骤
2023-5-8 阅读(102)
血清中针对某些抗原的特异性IgM常和特异性IgG同时存在,后者会干扰IgM抗体的测定。因此测定IgM抗本多用捕获法,先将所有血清IgM(包括异性IgM和非特异性IgM)固定在固相上,在去除IgG后再测定特异性IgM。操作步骤如下:
1、将抗人IgM抗体连接在固相载体上,形成固相抗人IgM。洗涤。
2、加入稀释的血清标本:保温反应后血清中的IgM抗体被固相抗体捕获。洗涤除去其他免疫球蛋白和血清中的杂质成分。
3、加入特异性抗原试剂:它只与固相上的特异性IgM结合。洗涤。
4、加入针对特异性的酶标抗体:使之与结合在固相上的抗原反应结合。洗涤。
5、加底物显色:如有颜色显示,则表示血清标本中的特异性IgM抗体存在,是为阳性反应。