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抗体稳定性检测的方法有什么?
2025-5-19 阅读(15)
抗体应该是蛋白中属于比较稳定的,其Tm值基本上在70度左右。但是这只是跟其它的蛋白相比,作为生物大分子蛋白的本身属性,抗体还是存在不稳定性,会失活降解。目前抗体在研发以及医疗领域广泛应用,如若其活性变化将造成不可预知的后果,因此完善的抗体稳定性的检测方法是目前抗体市场bu可或缺,通过检测确定其可用的条件以及有效期限。
检测抗体稳定性的方法主要包括:
1. 长期实验(Real time):将抗体存放在实际保存温度下,在不同的时间点取出后检测其活性、纯度、浓度等特性,直至抗体不再具有相应产品特性。此期限则为其有效的使用和保存期限。
2. 加速稳定实验:将抗体放入高温存储条件,如室温、37℃等,在不同的时间点取出后检测其特性。根据其在高温下失活的期限推算在实际存放条件下的保存和使用期限。
3. 反复冻融:通过反复冻融来检测抗体的稳定性,每次冻融后检测抗体特性,直至抗体不再具有相应产品特性。
4. 运输条件模拟:测试抗体在模拟运输过程中的稳定性。1
此外,抗体的稳定性还与其浓度、保存方法和溶液体系有关。抗体在1-10mg/mL浓度范围内比较稳定,应选择低吸附材料的包装管,并避免反复冻融。不同溶液体系如PBS、Tris、Hepes等可能影响抗体稳定性,有时会加入保护剂如叠氮钠、BSA、蔗糖、海藻糖来提高稳定性。