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上海邦景实业有限公司
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ELISA试验中主要HRP底物氯萘酚操作步骤
2025-5-27 阅读(9)
ELISA试验中主要HRP底物氯萘酚可以形成一种蓝黑色产物。敏感性低于DAB，且产物可溶于醇中。它适用于当DAB反应形成较高背景或要求改变产物的颜色。
1. 需要的溶液和特殊设备
0.03％氯萘酚，用无水乙醇溶解(贮存在-20℃)，0.05 mol／LTris(pH7.6)，过氧化氢，Gelvatol或者Mowiol，光学显微镜(通常带有照相机以便于记录结果)。
2. 操作步骤
(1) 氯萘酚贮存液的准备：用10 mL无水乙醇溶解0.3 g氯萘酚，贮存于-20℃；
(2) 加100 μL 氯萘酚贮存液至10 mL 0.05 mol/LTris(pH7.6)；
(3) 加0.1 mL 3％过氧化氢于水中。过氧化氢一般是以30％的溶液提供，4℃可存放1个月；
(4) 白色沉淀可用滤纸过滤去除；
(5) 加此溶液到标本中，并在室温孵育10～40 min，水洗终止反应；
(6) 优化：如果需要，进行复染，但只可使用水溶性染料；
(7) 用Gelvatol或者Mowiol封片。
