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上海邦景实业有限公司
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上皮细胞株体制备方法步骤
2018-4-16 阅读(911)
上皮细胞株体制备方法步骤
（1）秋水仙素处理：取骨髓前3h先给小鼠腹腔注入秋水仙素，注射剂量为100μg／kg动物体重。
（2）取骨髓：用损伤脊髓法处死小鼠，然后用剪刀剪开大腿上的皮肤和肌肉，取出大腿骨，用一小块纱布搓干净附在骨上的肌肉碎渣。剪掉股骨两端膨大的关节头，然后用注射器吸取5ml 0.85％生理盐水，插入股骨一端，将骨髓细胞冲洗至10ml的离心管中。可重复冲洗多次，直至骨髓腔呈白色为止。
（3）低渗处理：将所获得的细胞悬浮液以 1000rpm离心10min，吸去上清液，留0.2ml沉淀物，加0.075mol/L KCL 溶液（37℃）至8ml刻度，将细胞沉淀物吹散打匀，在37℃水浴低渗25min。
（4）固定：低渗处理后，立即加入1ml新配制且预冷的固定液，抽打均匀，然后1000 rpm离心10min，弃上清。沿管壁加固定液至6ml， 吹散细胞后静止固定10min，即*次固定。按上述条件离心，去上清液，再次加入固定液至6ml，进行第二次固定。10min后离心吸去上清液，留0.2ml沉淀物，再往沉淀物中滴加4滴固定液，冲匀制成细胞悬液。
（5）滴片：取事先在冰箱中预冷的载玻片，从约15cm高处向每个载玻片上滴1～2滴细胞悬液于粘有冰水的载玻片上，晾干。
（6）染色：取制片平放在玻璃板上，用1∶9 Giemsa染液染色20min，流水冲洗后晾干。
（7）观察：小白鼠染色体的形态特征，并计算2n的染色体数目。
上皮细胞株5 x 10^5 cells/vial 大鼠星形胶质细胞 RA
5 x 10^5 cells/vial 大鼠小脑星形胶质细胞 RA-c
5 x 10^5 cells/vial 大鼠海马趾星形胶质细胞 RA-h
5 x 10^5 cells/vial 大鼠小胶质细胞 RM
5 x 10^5 cells/vial 大鼠淋巴成纤维细胞 RLF
5 x 10^5 cells/vial 大鼠肺泡上皮细胞 RPAEpiC
5 x 10^5 cells/vial 大鼠肾小管上皮细胞 RRTEpiC
5 x 10^5 cells/vial 大鼠肝星形细胞 RHSteC
1 x 10^6 cells/vial 大鼠心肌细胞 RCM
5 x 10^5 cells/vial 大鼠间充质干细胞-骨髓 RMSC
5 x 10^5 cells/vial 小鼠垂体细胞 MPC
5 x 10^5 cells/vial 小鼠脑膜细胞 MMenC
1 x 10^6 cells/vial 小鼠脑脊神经元 MN-r
1 x 10^6 cells/vial 小鼠黑质神经元 MN-sn
1 x 10^6 cells/vial 小鼠纹状体神经元 MN-s
1 x 10^6 cells/vial 小鼠海马趾神经元 MN-h
1 x 10^6 cells/vial 小鼠皮质神经元 MN-c
1 x 10^6 cells/vial 小鼠颗粒细胞 MGC
1 x 10^6 cells/vial 小鼠腹脊髓神经元 MN-vsc
1 x 10^6 cells/vial 小鼠背脊髓神经元 MN-dsc
5 x 10^5 cells/vial 小鼠少突胶质前体细胞 MOPC
5 x 10^5 cells/vial 小鼠雪旺细胞 MSC
5 x 10^5 cells/vial 小鼠周神经成纤维细胞 MPNF
5 x 10^5 cells/vial 小鼠星形胶质细胞 MA
5 x 10^5 cells/vial 小鼠小脑星形胶质细胞 MA-c
5 x 10^5 cells/vial 小鼠海马趾星形胶质细胞 MA-h
5 x 10^5 cells/vial 小鼠小胶质细胞 MM
1 x 10^6 cells/vial 小鼠巨噬细胞 MMa
5 x 10^5 cells/vial 小鼠淋巴成纤维细胞 MLF
5 x 10^5 cells/vial 小鼠肾小管上皮细胞 MREpiC上皮细胞株
