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上海邦景实业有限公司
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人源细胞实验当中问题及解决方法
2018-9-14 阅读(428)
人源细胞实验当中问题及解决方法
1 选择试剂选择质量优异的检测试剂，严峻按照试剂阐明书进行操作，操作前将elisa试剂盒在室温下平衡30-60分钟。
2 加样可能原因：1）血清或血浆标本分别欠好即进行加样；2）手工操作中，加样板过多构成加样后放入孵箱前等候时间过长；3）加完标本再加酶试剂时酶溅起孔外。解决办法：1）标本为血清：将血液先天然存放1-2小时后，再用3000rmp离心15分钟；标本为血浆：有必要运用含抗凝剂的血液标本搜集管，采血后有必要当即倒置混合5-10次，放置一段时间后，3000rpm离心15分钟；若在几天内检测，可放在2-8℃冰箱中，若要贮存，则置于-20℃的低温冰箱内。2)加样后及时放入孵箱。3)加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。4)如果选用AT或其他全自动加样，选择FAME或其他后处理仪器加酶试剂。5)标本较多时，请分批操作。
3 孵育可能原因：1)孵育时未贴封片或加盖，使标本或稀释液蒸腾，吸附于孔壁，难于清洗*；2)孵育时间人为延伸，导致非特异性结合紧附于反应孔周围，难以清洗*。解决办法：1)贴封片或加盖；2)按阐明进程严峻控制操作时间。
4 洗板可能原因：1)选用手工洗板，孔与孔之间液体交叉。2)选用半自动洗板机洗板时，洗液量缺少，导致洗板不*；洗板针堵塞，抽吸不*；洗板不畅，导致洗板效果差。3)反应板过多构成洗板等候时间长。解决办法：1)保证洗液注满各孔，洗板针疏通，洗完板后在吸水纸上轻轻拍干；2)合理安排，或多用几台洗板机。
5 显色可能原因：1显色剂后放置时间过长或运用过期显色剂；2)加显色剂时溅起孔外构成液体回流。解决办法：1)显色剂尽量在临用前，坚持不用过期显色剂，肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用；2)加样时坚持显色剂不外流；3)A、B液应避免接触金属器械。
6 中止可能原因如加中止液时发作较多气泡，导致假阳性增加。所以在加中止液时应避免发作气泡。
7 读板如读板时板底不清洁等。应保证酶标板清洁。
