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人源细胞实验的基质效应
2018-9-18 阅读(385)
人源细胞实验的基质效应
基质是指样品中目标分析物以外的部分,由于基质成分会对分析过程有显著干扰,影响分析结果的准确性。业内把这些影响统称为基质效应(Matrix Effects)。这是免疫检测方法开发和使用中需要避开的大坑。
基质效应的原因错综复杂,但不用担心,有两种简单的方法可以用来评估基质效应。
1. 线性稀释:
一般来讲,抗原和捕获/检测抗体之间的结合作用很强,样品浓度被稀释并不影响它们的结合,而造成基质效应的非特异结合的力要弱很多,如果不断稀释样品,非特异结合造成的干扰会逐步减少,测量值也更接近真实值。没有基质效应时,无论如何稀释,测量值都和真实值吻合。而有基质效应时,稀释会造成非特异性结合比例的减少,测量值也相应地产生很大改变。基质效应导致的结果有假阴性和假阳性两种,在线性稀释时就可以辨别出来。不同品牌的ELISA 试剂盒表现差距非常大。
2. 掺入/回收率实验(Spike/Recovery Assay)
基质效应还可以通过分析物的掺入/回收率实验发现,将低、中和高浓度的分析物掺入到已测定过浓度的样本中,掺入前后实测到的浓度增加部分与掺入浓度之比就是回收率,回收率以百分比的形式呈现。回收率介于80-120%,才符合标准。
基质效应可以通过产品阶段的优化尽可能去消除的。所以为什么一定要使用试剂盒配套的稀释液?不合适的样本稀释液很多时候会加大基质效应,影响免疫反应体系,导致实验误差加大。在ELISA试剂盒领域,WKSUBIO系列的试剂盒是高品质的试剂盒。