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上海博湖生物科技有限公司
主营产品： 高密度脂蛋白ELISA检测试剂盒,同型半胱氨酸ELISA检测试剂盒,游离脂肪酸ELISA检测试剂盒 |
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大鼠膜联蛋白Ⅰ（ANX-Ⅰ）试剂盒使用说明书
2019-6-25 阅读(125)
| 提 供 商 | 上海博湖生物科技有限公司 | 资料大小 | 20.8KB |
|---|---|---|---|
| 资料图片 | 【点击查看】 | 下载次数 | 35次 |
| 资料类型 | JPG 图片 | 浏览次数 | 125次 |
大鼠膜联蛋白Ⅰ(ANX-Ⅰ)试剂盒使用说明书
本试剂盒仅供研究使用。
检测范围：
3µg/L -125µg/L
本试剂盒用于测定大鼠血清、血浆及相关液体样本中膜联蛋白Ⅰ(ANX-Ⅰ)含量。
实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠膜联蛋白Ⅰ(ANX-Ⅰ)水平。用纯化的大鼠
膜联蛋白Ⅰ(ANX-Ⅰ)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入膜联
蛋白Ⅰ(ANX-Ⅰ)，再与 HRP 标记的膜联蛋白Ⅰ(ANX-Ⅰ)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗
体复合物，经过*洗涤后加底物 TMB 显色。TMB 在 HRP 酶的催化下转化成蓝色，并在
酸的作用下转化成终的黄色。颜色的深浅和样品中的膜联蛋白Ⅰ(ANX-Ⅰ)呈正相关。用
酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度（OD 值），通过标准曲线计算样品中大鼠膜联蛋白Ⅰ
(ANX-Ⅰ)浓度。
试剂盒组成
1 30 倍浓缩洗涤液
20ml×1 瓶
7 终止液
6ml×1 瓶
2 酶标试剂
6ml×1 瓶
8 标准品（240µg/L） 0.5ml×1 瓶
3 酶标包被板
4 样品稀释液
5 显色剂 A 液
6 显色剂 B 液
标本要求
12 孔×8 条
6ml×1 瓶
6ml×1 瓶
6ml×1/瓶
9 标准品稀释液
10 说明书
11 封板膜
12 密封袋
1.5ml×1 瓶
1 份
2 张
1 个
待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样 50µl，待测样品孔中先加样品稀释液 40µl，
然后再加待测样品 10µl（样品终稀释度为 5 倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽
量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3. 温育：用封板膜封板后置 37℃温育 30 分钟。
4. 配液：将 30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30 倍稀释后备用
5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置 30 秒后弃去，如此
重复 5 次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶标试剂 50µl，空白孔除外。
7. 温育：操作同 3。
8. 洗涤：操作同 5。
9. 显色：每孔先加入显色剂 A50µl，再加入显色剂 B50µl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色
15 分钟.
10. 终止：每孔加终止液 50µl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
11. 测定：以空白空调零，450nm 波长依序测量各孔的吸光度（OD 值）。 测定应在加终止
液后 15 分钟以内进行。
计算
以标准物的浓度为横坐标，OD 值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的
OD 值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与 OD 值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的 OD 值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，
即为样品的实际浓度。
注意事项
1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡 15-30 分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未
用完，板条应装入密封袋中保存。
2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。
3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间
控制在 5 分钟内，如标本数量多，使用排枪加样。
4． 请每次测定的同时做标准曲做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本 OD 值
大于标准品孔孔的 OD 值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n 倍）后再测定，计
算时请后乘以总稀释倍数（×n×5）。
5． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6．底物请避光保存。
7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9．本试剂不同批号组分不得混用。
10. 如与英文说明书有异，以英文说明书为准。
保存条件及有效期
1．试剂盒保存：；2-8℃。
2．有效期：6 个月
