人庚肝抗体（HGVAb）ELISA试剂盒

人庚肝抗体（HGVAb） ELISA 试剂盒

本试剂盒仅供研究使用。

药品名称：

通用名： 人庚肝抗体 （HGVAb） 酶联免疫 分析试剂盒

使用目的：

本试剂盒用于定性测定人血清，血浆及相关液体样本中 庚肝抗体 （HGVAb） 。

实验原理

本试剂盒采用间接法测定标本中 人 庚肝抗体 （HGVAb） 。用纯化的庚肝 抗原包被微孔板，制成固相抗原，与样品中庚肝抗体 （HGVAb） 温育后，加入*标记的抗 IgG 抗体， 再与链霉亲和素 -HRP 结合，形成免疫复合物，经过*洗涤后加底物 TMB 显色。 TMB 在 HRP 酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成zui终的黄色。用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度（ OD 值），与 CUTOFF 值相比较，从而判定标本中 人 庚肝抗体 （HGVAb） 的存在与否。 ，

试剂盒组成

1	20 倍浓缩洗涤液	50ml × 1 瓶	8	样品稀释液	6ml × 1 瓶
2	链霉亲和素 -HRP	6ml × 1 瓶	9	阴性对照	0.5ml × 1 瓶
3	酶标包被板	12 孔× 8 条	10	阳性对照	0.5ml × 1 瓶
4	*标记的抗 -IgG 抗体	6ml × 1 瓶	11	密封袋	1 个
5	显色剂 A 液	6ml × 1 瓶	12	封板膜	3 张
6	显色剂 B 液	6ml × 1/ 瓶	13	说明书	1 份
7	终止液	6ml × 1 瓶

标本要求

1 ． 不能检测含NaN3的样品 ，因 NaN3 抑制辣根过氧化物酶的（ HRP ）活性。

2． 标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可 将标本放于 -20 ℃ 保存，但 应避免反复冻融

操作步骤

1. 编号：将样品对应微孔按序编号，每板应设阴性对照 2 孔、 阳性对照 2 孔、空白对照 1 孔

2. 加样：分别在阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照 50μl 。然后在 待测样品孔先加样品稀释液 40 μl ，然后再加待测样品 10 μl 。 加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀 ， 37 ℃ 温育 45 分钟。

3. 配液：将 20 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 20 倍稀释后备用

4. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置 30 秒后弃去，如此重复 4 次，拍干。

5. 加*标记的抗 -IgG 抗体：每孔加入*标记的抗 -IgG 抗体 50μl 。 37 ℃ 温育 30 分钟

6. 洗涤：操作同 4 。

7. 加链霉亲和素 -HRP ：每孔加入 50μl 的链酶亲和素 -HRP ，轻轻振荡混匀， 37 ℃ 温育 30 分钟。

8. 洗涤：操作同 4 。

9. 显色：每孔先加入显色剂 A 50μl ，再加入显色剂 B 50μl ，轻轻震荡混匀， 37 ℃ 避光显色15分钟.

10. 终止：每孔加终止液 50μl ，终止反应（此时蓝色立转黄色）。

11. 测定：以空白空调零， 450nm 波长依序测量各孔的吸光度（ OD 值）。 测定应在加终止液后 15 分钟以内进行。

结果判定：

试验有效性：阳性对照孔平均值 ≥1.00; 阴性对照平均值 ≤0.10

临界值（ CUT OFF ）计算：临界值 = 阴性对照孔平均值 +0.15

阴性判定：样品 OD 值 < 临界值（ CUT OFF ）者为人 庚肝抗体 （HGVAb） 阴性

阳性判定：样品 OD 值 ≥ 临界值（ CUT OFF ）者为人 庚肝抗体 （HGVAb） 阳性

注意事项

1 ．操作严格按照说明书进行，本试剂不同批号组分不得混用。

2 ．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡 15-30 分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。

3 ．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。

4． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

5 ．底物请避光保存。

6 ．试验结果判定必须以酶标仪读数为准，使用双波长检测时，参考波长为 630nm

7 ．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。终止液为 2M 的硫酸，使用时必须注意安全。

规格：

96 人份 / 盒

保存条件及有效期

1 ．试剂盒保存： ； 2 -8 ℃ 。

2 ．有效期： 6 个月

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