液相色谱仪测定废水中泰乐菌素残留量

随着环保意识的逐渐增强，人们越来越关注抗生素在环境中的积蓄 、转移、转化和对各种生物及人类健康的影响，成为一个新的研究热点 。 泰乐菌素是十六环的大环内酯类抗生素，为畜禽抗生素药物 ，对革兰氏阳性菌和支原体有较强的抑制能力。当含有泰乐菌素的药厂废水不加检控处理，直接进入河流、湖泊等水环境时，将在水产动物肌体内积蓄，使细菌产生抗药性 。如果这种抗药性转移给感染人的细菌，会导致针对人细菌的抗生素效力降低或失去抗菌作用。因此对废水中的抗生素含量进行检测控制势在必行。

实验采用HPLC 结合固相萃取技术对废水中泰乐菌素的进行检测。

一、仪器设备

LC-600B型液相色谱仪

LC-600B智能全控液相色谱系统由1台P600B高压恒流泵、1台UV600B紫外检测器与1台SCL600B系统控制器直接构成等度分析系统。*采用柱塞浮动式安装方式，增强仪器性能的稳定性和使用的持久性。广泛应用于研究开发、医药检验、食品检测、化工分析、监测等众多分析领域。

氮吹仪

1.干式加热(HGC系列)和水浴加热(HSC系列)两个系列,可满足不同用户的使用需求.

2.数字温控器,双数字显示,调节采用PID技术并可实现超温报警.

3.分配室上各气针通道可组合使用或单独使用,分配室的高度可视需要调节.

4.可能与溶剂接触的部件均采用316不锈钢材料、合金铝、或表面进行塑料喷涂，使用寿命更长，清洁更方便。

5.HGC系列一般标配的加热块规格为￠15mm、￠17mm、￠21mm，特殊规格加热块孔径及形式可提前预定。

超纯水处理器

依照“层层保护，逐级过滤”的设计理念，水质电阻率可达到18.25ΜΩ·cm（25℃），适用于各种标准实验、痕量分析、原子吸收、荧光分析、生化分析、环境分析、血清检查、气相色谱以及液相等用水。广泛应用于材料科学、生命科学、空间技术等领域中以及食品、药品、自然环境中微量元素和重金属元素检测实验。

二、实验方法

（1）标准储备液的配制：

准确称取0.1g(到 0.0001g)泰乐菌素标准品，用甲醇溶解并定容于 100mL棕色容量瓶中，摇匀。此溶液质量浓度为 1g/L，置于冰箱中避光保存备用。

（2）标准曲线的绘制：

将上述标准储备液逐级稀释至质量浓度为10mg/L。分别移取稀释后的标准溶液 0、0.2、0.5、1.0、2.0、4.0、5.0mL于容量瓶中，用水定容至10mL，以约2mL/min的速度分别通过固相萃取柱。待溶液全部流出后以10mL水淋洗，弃去淋洗液，继续减压抽干5min，以10mL甲醇洗脱柱上的吸附物并收集于小试管中，在氮吹仪上将洗脱液吹干，用流动相定容1mL，待测。

（3）固相萃取柱活化：

将固相色谱柱置于固定架上，加入10mL甲醇，待甲醇流完后用10mL二次蒸馏水冲洗两次。

（4）废水样品的测定：

将新采集的废水水样用孔径 0.45μm微滤膜过滤后，视废水中的泰乐菌素浓度取一定量的滤液通过固相萃取柱，采用与标准曲线绘制相同的方法进行处理。

三、色谱条件

固相萃取柱	ODS-SPE spec (500 mg， 6 mL)
色谱柱	Kromasil C18(250 mm×4.6 mm，5 μm)
流动相	为V(乙腈)∶V(0.5% 磷酸)=90∶10
紫外检测器波长	282nm
流动相流速	1mL/min
柱温	30℃

四、色谱图