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酸性磷酸酶的显示方法1.目的与原理实验目的:掌握Comori法的基本原理和方法。观察酸性磷酸酶在细胞内的分布状况。实验原理:酸性磷酸酶能分解磷酸脂而释放出磷酸基。在pH5.0的环境中,磷酸基能与铅盐反应形成磷酸铅。但因其是无色的,所以再经过与硫化铵作用,形成棕黑色的硫化铅沉淀,由此就能显示酸性磷酸酶在细胞内的存在与分布。本实验的技术特点是:(1)采用冷冻涂片和中性福尔马林固定,可避免在固定、包埋及制片过程中酶的失活,保证了实验的稳定性。(2)采用较短的作用时间,可避免细胞质内其它蛋白质及核内出现
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一、实验目的1.了解细胞膜对物质通透性的一般规律。2.了解溶血现象及其发生机制。二、实验原理细胞膜是细胞与环境进行物质交换的选择通透性屏障。它是一种半透膜,可选择性控制物质进出细胞。各种物质出入细胞的方式是不同的,水是生物界zui普遍的溶剂,水分子可以按照物质浓度梯度从渗透压低的一侧通过细胞膜向渗透压高的一侧扩散,这种现象就是渗透。渗透作用是细胞膜的主要功能之一。将红细胞放在低渗盐溶液中,水分子大量渗到细胞内,可使细胞胀破,血红蛋白释放到介质中,由不透明的红细胞悬液变为红色透明的血红蛋白溶液,这
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WesternBlot(免疫印迹法)步骤主要包括以下4个基本步骤:样品制备;电泳分离;蛋白的膜转移;免疫杂交与显色――蛋白检测。溶液和试剂1.1X磷酸盐缓冲液(PBS)2.ModifiedRIPAbuffer:Tris-HCl:50mM,pH7.4;NP-40:1%;Na-deoxycholate:0.25%;NaCl:150mM;EDTA:1mM;PMSF:1mM;Aprotinin,leupeptin,pepstatin:1microgram/mleach;Na3VO4:1mM;NaF:1m
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凝胶电泳操作注意事项1.缓冲系统:在没有离子存在时,电导率zui小,DNA不迁移,或迁移极慢,在高离子强度的缓冲液中,电导很高并产热,可能导致DNA变性,因此应注意缓冲液的使用是否正确.长时间高压电泳时,常更新缓冲液或在两槽间进行缓冲液的循环是可取的.2.琼脂糖:不同厂家、不同批号的琼脂糖,其杂质含量不同,影响DNA的迁移及荧光背景的强度,应有选择地使用.3.凝胶的制备:凝胶中所加缓冲液应与电泳槽中的相一致,溶解的凝胶应及时倒入板中,避免倒入前凝固结块.倒入板中的凝胶应避免出现气泡,影响电泳结果
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活细胞间接免疫荧光法实验操作方法一.实验器材:1.器材:40孔塑料板、40孔板离心机、微量加样器、振荡器、盖玻片、荧光显微镜等。2.试剂:单抗隆抗体(单抗)、荧光标记抗鼠免疫球蛋白、PBS(pH7.2-7.4)、甘油、叠氮钠(NaN3)等。二.方法(微量法)1.将分离好的单个核细胞用PBS洗2次,1000rpm每次10分钟。用含0.1%NaN3PBS调细胞浓度在0.5-1×108/ml(5000万-1亿/ml),加在40孔板上,每孔10ul,含5-10×105细胞,然后加入单抗(*抗体)50ul
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上海劲马实验设备有限公司专业供应各种种属蛋白elisa试剂盒,提供免费代测服务,保证实验结果客观真实性。我公司对试剂盒质量100%保证,若存在质量问题,我们无条件包退换。若需要了解试剂盒的详细信息,请来的咨询::业务:何细胞分裂是机体发育和组织维持的基础过程,巴塞罗那生物医学研究所IRB和基因组调控中心CRG的一项研究证实,Nek9蛋白是细胞分裂的决定性因素。这项研究由巴塞罗那IRB研究者JoanRoig和CRG的IsabelleVernos领导,研究显示细胞需要Nek9蛋白才能正确分配染色体,
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碱性成纤维生长因子(简称bFGF)是哺乳动物和人体内存在的一种微量物质,在多种组织细胞中分布有bFGF受体,因而其生理作用广泛,是一种多功能细胞生长因子,bFGF于1974年首先由美国科学家Gospodarowicz从牛垂体中分离出,方法复杂,价格昂贵。现在运用基因工程技术,由大肠杆菌可大量表达生产高活性、高纯度的bFGF,从而使之大规模应用于临床。国内外大量研究结果表明,bFGF通过促进与创伤修复有关的几乎所有细胞的迅速增殖而推动创面主动修复,显著缩短创面愈合时间,全面提高创伤愈合质量,特别是
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HSP0抗原呈递的作用HSP70家族在抗原呈递中扮演重要的角色。在肿瘤细胞表面的HSP70可以引发针对该肿瘤细胞的特异性免疫,并与DC(树突状细胞)抗肿瘤作用有关[6]。肿瘤细胞自身呈递抗原效率非常低下,原因在于肿瘤细胞MHCI类分子往往低表达以及共同刺激分子缺乏,因此具有肿瘤特异性的CD4+和CD8+淋巴细胞的激活必须依赖于抗原提呈细胞的帮助,在由抗原呈递细胞将内源性抗原和外源性抗原,经MHCⅠ类分子途径和MHCⅡ类分子途径,分别将抗原信息呈递给CD8+T淋巴细胞和CD4+T淋巴细胞,通过NK