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上海邦景实业有限公司
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人胚肾细胞实验规则的几点
2020-10-21 阅读(467)
人胚肾细胞实验规则：
1、要保证移液枪的准确性，误差不能超过2%。可用水和电子天平进行确定。但有专业人员进行矫正。
2、要配备20ul、50ul、100ul、1000ul和排枪各一支。吸取不同的液体后，要更换枪头。即使是吸取标准品时。
3、要在实验前1小时将试剂盒从冰箱中取出，使各种人胚肾细胞都恢复到室温，以使结果更稳定。
4、实验时，要使底物避光保存。
5、用枪吸取液体时速度不能太快，以免产生气泡而使吸取量不准确。
6、吸取液体时，要用量程和需要量接近的枪去吸，减少误差。
7、将液体加到酶标孔中时，避免枪头和孔内液体接触，可使枪头上的液滴和孔壁接触，液滴会自然流下去。
8、液体全部加完后，可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动30秒，混匀液体。也可以用酶标仪的晃动功能。
9、应尽量做双孔实验，这样才能保证数据的准确性。
10、对结果有疑问的样品要用其它方法进行确证。
大鼠骨成型蛋白4(BMP-4)ELISA试剂盒 规格： 96T/48T
大鼠骨成型蛋白2(BMP-2)ELISA试剂盒 规格： 96T/48T
大鼠骨碱性磷酸酶(BALP)ELISA试剂盒 规格： 96T/48T
大鼠膀胱肿瘤抗原(BTA)ELISA试剂盒 规格： 96T/48T
大鼠大内皮素(Big ET)ELISA试剂盒 规格： 96T/48T
大鼠BH3结构域凋亡诱导蛋白(Bid)ELISA试剂盒 规格： 96T/48T
大鼠β位淀粉样前体蛋白裂解酶2(BACE2)ELISA试剂盒 规格： 96T/48T
大鼠β羟丁酸(βOHB)ELISA试剂盒 规格： 96T/48T
大鼠β内啡肽(β-EP)ELISA试剂盒 规格： 96T/48T
大鼠β内啡肽受体(β-EPR)ELISA试剂盒 规格： 96T/48T
大鼠β细胞素(BTC)ELISA试剂盒 规格： 96T/48T
人胚肾细胞注意事项：
（1）需要保存的血清必须储存于-20℃ - 70℃ 低温冰箱中.4℃冰箱中保存时间切勿超过1个月.由于血清结冰时体积会增加约10%,因此,血清在冻入低温冰箱前,必须预留一定体积空间,否则易发生污染或玻璃瓶冻裂.
（2）瓶装血清解冻需采用逐步解冻法:-20℃ 至 -70℃ 低温冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天.然后移入室温,待全部溶解后再分装.在溶解过程中需不断轻轻摇晃均匀（小心勿造成气泡）,使温度与成分均一,减少沉淀的发生.切勿直接将血清从-20℃进入37℃解冻,这样因温度改变太大,容易造成蛋白质凝集而出现沉淀.
（3）热灭活是指56℃, 30分钟加热已*解冻的人胚肾细胞.加热过程中须规则摇晃均匀.此热处理的目的是使血清中的补体成分（complement）灭活.除非必须,一般不建议作此热处理,因为热处理会造成血清沉淀物显著增多,而且还会影响血清的质量.补体参与反应有:细胞毒作用, 平滑肌细胞收缩, 肥大细胞和血小板释放组胺, 增强吞噬作用, 促进淋巴细胞和巨噬细胞发生化学趋化和活化.
（4）血清中的沉淀物 絮状物:主要是血清中的脂蛋白变性及解冻后血清中纤维蛋白造成,这些絮状物不会影响血清本身的质量.可用离心3000rpm, 5分钟去除,也可不用处理. 显微镜下"小黑点":经过热处理过的血清,沉淀物的形成会显著增多.有些沉淀物在显微镜下观察象"小黑点",常误认为血清受污染.一般情况下,此小黑点不会影响细胞生长,但如果怀疑血清质量,则应立即停止使用,更换另一批号的血清.
（5）一般提供的血清为无菌,无需再过滤除菌.如发现血清有悬浮物,则可将血清加入培养液内一起过滤,切勿直接过滤血清.
